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熒光酶標儀和光吸收酶標儀原理介紹

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時間:2019-10-08 15:03:02

酶標儀是構成酶免查驗工作站的其間一種醫療器械,還有一個比較重要的設備是洗板機,酶標儀有熒光酶標儀和光吸收酶標儀之分,那么熒光酶標儀原理與光吸收酶標儀原理有什么區別呢?具體內容如下所示:


熒光酶標儀原理

由光源氙弧燈發出的光經過切光器使其變成斷續之光以及激起光單色器變成單色光后,此光即為熒光物質的激起光,被測的熒光物質在激起光照耀下所發出的熒光,經過單色器變成單色熒光后照耀于測樣品用的光電倍增管上,由其所發生的光電流經過放大器放大輸至記載儀,激起光單色器和熒光單色器的光柵均由電動機帶動的凸輪所控制,當測繪熒光發射光譜時,將激起光單色器的光柵,固定在zui恰當的激起光波利益,而讓熒光單色器凸輪滾動,將各波長的熒光強度訊號輸出至記載儀上,所記載的光譜即發射光譜。

當測繪熒光激起光譜時,將熒光單色器的光柵固定在zui恰當的熒光波利益,只讓激起光單色口的凸輪滾動,將各波長的激起光的強度訊號輸出至記載儀,所記載的光譜即激起。

當進行樣品溶液的定量分析時,將激起光單色器固定在所挑選的激起光波利益,將熒光單色器調理至所挑選的熒光波利益,由記載儀得出的信號是樣品溶液的熒光強度。


光吸收酶標儀原理

光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。光吸收酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物吸光值。jjymafwh

光經過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量聯系。

檢測單位用OD值表明,OD是opticaldelnsity(光密度)的縮寫,表明被檢測物吸收掉的光密度,OD=1og(1/trans),其間trans為檢測物的透光值。依據Bouger-amberT-beer規律,OD值與光強度成下述聯系:E=OD=logΙ0/Ι其間E表明被吸收的光密度,Ι0為在檢測物之前的光強度,Ι為從被檢測物出來的光強度。


OD值由下述公式核算:

E=OD=C×D×E

C為檢測物的濃度

D為檢測物的厚度

E為摩爾因子


在特定波長下測定每一種物質都有其特定的波長,在此波長下,此物質能夠吸收zui多的光能量。如果挑選其它的波長段,就會形成檢測成果的不準確。因此,在測定檢測物時,我們挑選特定的波長進行檢測,稱為測量波長。


可是每一種物質對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準確性。在參照波長下,檢測物光的吸收zui小。酶標儀檢測波長和參照波長的吸光值之差能夠消除非特異性吸收。




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