安捷倫液相色譜儀的標準操作
安捷倫液相色譜儀的標準操作
1. 目的:清晰安捷倫液相色譜儀的標準操作,確保數據的準確性。
2. 規模:適用于安捷倫液相色譜儀。
3. 職責:查驗人員對此負責。
4. 操作規程:

4.1 體系組成
本體系由1個溶劑二元輸送泵(分主/A泵和副/B泵)、手動進樣閥、柱溫箱、檢測器、化學工作站和電腦等組成。
4.2 安捷倫液相色譜儀預備
4.2.1運用前應根據待檢樣品的查驗辦法預備所需的活動相,用適宜的0.45μm濾膜過濾,超聲脫氣20min。
4.2.2 根據待檢樣品的需要替換適宜的色譜柱(柱進出口位置應與活動相流向一致)和定量環。
4.2.3 制造樣品和標準溶液(也可在平衡體系時制造),用適宜的0.45μm濾膜過濾。
4.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數據線和輸液管道是否連接正常
4.1 將待測樣品按要求前處理,預備HPLC 所需活動相,檢查線路是否連接完好,廢液瓶是否夠用等。
4.3安捷倫液相色譜儀開機:
4.3.1 翻開計算機,進入中文Windows XP畫面,并運轉CAG Bootp Server程序。
4.3.2 翻開 1200 LC 各模塊電源。
4.3.3 待各模塊自檢完成后,雙擊[Instrument 1 Online]圖標,化學工作站主動與1200LC
通訊,進入的工作站畫面如下所示。
4.3.4 從[視圖]菜單中挑選[辦法和運轉操控]畫面, 點擊[視圖]菜單中的[顯現頂部 工具欄], [ 顯現狀況工具欄],[體系視圖],[樣品視圖],使其指令前有[√]標志,來調用所需的界面。
4.3.5 把活動相放入溶劑瓶中。
4.3.6 翻開沖洗閥。
4.3.7 點擊[泵]圖標,點擊[設置泵…]選項,進入泵修改畫面。
4.3.8 設流速:5ml/min,點擊[確認]。
4.3.9 點擊[泵] 圖標,點擊[操控…]選項,選中[發動],點擊[確認] ,則體系開端沖洗,直到管線內(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡停止,切換通道繼續沖洗,直到一切要用通道無氣泡停止。
4.3.10 點擊[泵] 圖標,點擊[操控…]選項,選中[封閉],點擊[確認]關泵, 封閉沖洗閥。
4.3.11 點擊[泵]圖標,點擊 [設置泵…選項],設流速:1.0ml/min。
4.3.12 點擊泵下面的瓶圖標,如下圖所示(以單元泵為例),輸入溶劑的實際體積和瓶體積。 也可輸入停泵的體積,點擊[確認]。
4.4 安捷倫液相色譜儀的數據收集辦法修改
4.4.1開端修改完好辦法:從[辦法]菜單中挑選[修改完好辦法…] 項,如下圖所示選中除[數據剖析 ]外的三項,點擊[確認],進入下一畫面。 4.4.2辦法信息
4.4.2.1在[辦法注釋]中參加辦法的信息(如:測驗辦法)。 4.4.2.2 點擊 [確認], 進入下一畫面。 4.4.3 泵參數設定
4.4.3.1 在[流速]處輸入流量,如1ml/min,在[溶劑 B]處輸入80.0,(A=100-B) ,也可[刺進 ]一行[時刻表] ,修改梯度。在[壓力限]處輸入柱子的zui大耐高壓,以維護柱子。
4.4.3.2 點擊[確認],進入下一畫面。
4.4.4 柱溫箱參數設定
4.4.4.1 在[溫度]下面的空白方框內輸入所需溫度,如:40度。并選中它,點擊[更多>>] 鍵,如圖所示,選中[與左邊相同],使柱溫箱的溫度左右一致。
4.4.4.2 點擊[確認],進入下一畫面。
4.4.5 檢測器參數設定:檢測波長:一般挑選zui大吸收處的波長。樣品帶寬:一般挑選zui大吸收值一半處的整個寬度。參比波長:一般挑選在接近樣品信號的無吸收或低吸收區域 。參比帶寬:至少要與樣品信號的帶寬相等,許多情況下用100nm作為缺省值。一起能夠輸入收集光譜辦法,步長,規模,閾值。選中所用的燈。
4.4.6 在[ 運轉時選項表 ]中選中[ 數據收集],點擊[確認]。
4.4.7 點擊[辦法]菜單,選中[辦法另存為…],輸入一辦法名,如[測驗],點擊[確認]。
4.4.8 從菜單 [視圖]中選中[在線信號],選中[信號窗口1],然后點擊[改動…] 鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點擊[確認]。(如一起檢測二個信號,則重復10,選中[信號窗口2]。
單擊[改動]鍵,即可彈出右側的[修改信號圖譜]窗口,從而挑選所需的譜圖信號。 4.4.9 從[運轉操控]菜單中挑選[樣品信息]選項,如下圖所示,輸入操作者稱號,如[安裝工程師];在[數據文件 ]中挑選[手動]或[前綴/計數器]。區別: 手動--每次做樣之前有必要給出新姓名,不然儀器會將前次的數據覆蓋掉。 Pr—在前綴/計數器----[前綴]框中輸入前綴,在[計數器]框中輸入計數器的起始位,儀器會主動命名,如vwd數據0001,vwd數據0002……。
4.4.10 點擊[確認] ,從[儀器] 菜單挑選[體系開啟]。
4.4.11 等儀器預備好,基線平穩,用試樣溶液清洗注射器,并掃除氣泡后抽取適量。
4.5 安捷倫液相色譜儀的數據剖析辦法修改:
4.5.1 從[視圖]菜單中,點擊[數據剖析]進入數據剖析畫面。
4.5.2 從[文件]菜單挑選[調用信號],選中您的數據文件名,如下圖所示。點擊[ 確認],則數據被調出。
4.5.3做譜圖優化:從[圖形]菜單中挑選[信號選項],如下圖所示。從[規模] 中挑選[滿量程] 或[主動量程] 及適宜的時刻規模或挑選[自定義量程] 調整。重復進行,直到圖的比例適宜停止。點擊[ 確認]。
4.6安捷倫液相色譜儀積分:
4.6.1 從[積分]菜單中挑選[積分事件]選項,如下圖所示。挑選適宜的[斜率靈敏度]
,[峰寬],[zui小峰面積],[zui小峰高]。
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