高效液相色譜儀貯液器介紹及影響梯度洗脫的因素
高效液相色譜儀貯液器概述:
高效液相色譜儀貯液器是用來存放流動相的容器,供給符合要求的流動相以完成液相色譜分析工作。
一、貯液器材質:
貯液器材質應耐腐蝕,對洗脫液呈化學惰性,可為玻璃、不銹鋼和聚四氟乙烯等材料。
二、貯液器容積:
貯液器容積與色譜柱的粗細、輸液泵的種類和所采用的液相色譜系統有關,一般容積約為0.5~2L,以便在不重復加液的情況下能連續工作。對凝膠色譜儀和制備液相色譜儀,其容積應更大一些。
三、貯液器放置位置:
貯液器放置位置要高于輸液泵,以保持一定的輸液靜壓差。
四、貯液器的密閉:
使用過程中貯液器應密閉,防止溶劑蒸發引起流動相組成的變化,防止空氣中O2和CO2重新溶解在已脫氣的流動相中。
五、溶劑的過濾:
高效液相色譜所用的溶劑在放入貯液器之前必須經過0.45um的濾膜過濾,除去溶劑中可能含有的機械性雜質,防止輸液管道或進樣閥產生阻塞。對輸出流動相的連接管路,其插入貯液器的一端通常要連有孔徑為0.45um的多孔不銹鋼過濾器或由玻璃制成的專用膜過濾器。

影響高效液相色譜儀梯度洗脫的因素:
高效液相色譜儀進行梯度洗脫時,選定溶劑A、B之后,設定梯度速度和梯度時間,確定梯度曲線形狀,要以zui經濟的梯度洗脫程序,實現樣品的zui佳化分離。影響梯度洗脫的因素有:
1、溶劑的純度要高,否則會使梯度洗脫的重現性變壞。
2、梯度混合的溶劑互溶性要好,應防止不互溶的溶劑進入色譜柱。
3、注意溶劑的粘度和密度對混合流動相組成的影響。
4、梯度洗脫應使用對流動相組成變化不敏感的選擇型檢測器,而不能使用對流動相組成變化敏感的通用型檢測器。
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