高效液相色譜（2）-島津LC—20AT型高效液相色譜儀操作規(guī)程
一、 流動相及樣品的準(zhǔn)備
1、流動相的選擇，有機(jī)溶劑必須是色譜級，水必須是超純水或二次蒸餾水。
2、流動相用0.45μm孔徑的濾膜過濾（水和有機(jī)相所用的濾膜不同，有機(jī)相用
F膜，水相用水膜），超聲脫氣后置于儲液瓶中。
3、根據(jù)待檢測樣品的需要更換合適的色譜柱。
4、樣品溶液亦必須用0.45μm的微孔濾膜過濾后才能進(jìn)樣。
二、 開關(guān)機(jī)順序
1、 開機(jī)順序：先打開泵、自動進(jìn)樣器、柱溫箱、檢測器電源，再打開系統(tǒng)控制器的電源，點(diǎn)擊電腦中的Lc-solution工作站聯(lián)機(jī)，連上后能聽到兩次“嘀”的聲音。
2、 關(guān)機(jī)順序：與開機(jī)順序相反，即先關(guān)閉Lc-solution工作站→系統(tǒng)控制器→泵、自動進(jìn)樣器、柱溫箱、檢測器。
3、 待設(shè)備自檢結(jié)束后，打開儀器對輸液泵及自動進(jìn)樣器進(jìn)行必要的Purge操作，排出相應(yīng)流路中的氣泡，使新鮮溶劑在流路中得以置換；檢查輸液泵在動作前的壓力顯示值，必要時對此壓力值進(jìn)行調(diào)零 。
三、 LC-solution 操作界面的進(jìn)入及系統(tǒng)的開啟
1、 雙擊桌面上Lc-solution圖標(biāo)，選擇屏幕左側(cè)“操作”項(xiàng)并單擊，在彈出的窗口中雙擊操作儀器所對應(yīng)的圖標(biāo)，彈出窗口后輸入用戶名ID及密碼，按“確定”進(jìn)入儀器實(shí)時分析界面 。
2、 點(diǎn)擊助手欄中的“儀器參數(shù)”進(jìn)入儀器參數(shù)設(shè)置界面，設(shè)置采樣時間，流動相流速及配比，檢測波長，柱溫等。在完成后點(diǎn)擊“下載”將分析參數(shù)傳輸至主機(jī)。
3、 分析方法的保存：選擇文件→另存方法文件為→選擇保存路徑→取名保存文件。該方法即作為當(dāng)前運(yùn)行的方法。
4、 打開儀器上的排空閥（逆時針方向旋轉(zhuǎn)180°），點(diǎn)擊儀器面板上“purge”
按鈕開始清洗5個流路3分鐘。
5、 系統(tǒng)的啟動：點(diǎn)擊“儀器開/關(guān)”鍵開啟系統(tǒng)（此時泵開始工作）
四、 進(jìn)樣準(zhǔn)備及單次進(jìn)樣分析
1、 將樣品瓶放入自動進(jìn)樣器中
2、 觀察基線及柱壓，待基線平直（-5~30mv），壓力穩(wěn)定（0.5Mpa）時方可進(jìn)樣。
3、 點(diǎn)擊助手欄中“單次分析” 鍵，出現(xiàn)采樣對話框。 在對話框中輸入“ 樣品名稱”，“樣品信息”，“方法文件名”，“數(shù)據(jù)文件名”，“樣品瓶號”，“樣品架號”，“ 進(jìn)樣量”等樣品參數(shù)。
4、 填完后點(diǎn)擊“確定”鍵，儀器開始自動進(jìn)樣操作。
五、 批處理分析
1、點(diǎn)擊批處理分析圖標(biāo)，點(diǎn)擊助手欄中的“向?qū)А薄＞庉嫹绞綖樾陆ɑ蛱砑樱椒ㄎ募J(rèn)為當(dāng)前方法，可根據(jù)需要選擇相應(yīng)方法。
2、根據(jù)提示逐步輸入“開始樣品編號”、“進(jìn)樣體積” →“樣品組數(shù)” →標(biāo)準(zhǔn)樣品“數(shù)據(jù)文件路徑、名稱”、“校正級別數(shù)”、“重復(fù)進(jìn)樣次數(shù)”未知樣品的信息。填寫后“完成”。
3、保存批處理文件：文件→批處理文件另存為→路徑、名稱→保存。
4、啟動批處理：儀器處于“就緒”狀態(tài)后點(diǎn)擊助手欄中的開始批處理，開始運(yùn)行。
六、 數(shù)據(jù)文件的查看及定量分析（外標(biāo)法為例）
1、 點(diǎn)擊助手欄中的“再解析”鍵，點(diǎn)擊“PDA數(shù)據(jù)分析”打開數(shù)據(jù)處理窗口。
2、 打開文件收索器，定位至數(shù)據(jù)文件所在的文件夾，選擇文件的類型，雙擊文件名即可打開數(shù)據(jù)文件（此時可以查看峰面積、保留時間等參數(shù)）。
3、 點(diǎn)擊助手欄中的向?qū)В鸩教顚懴嚓P(guān)信息直至完成。
4、 另存方法文件為→對話框選擇“是” →選擇保存路徑和名稱→點(diǎn)擊“確定”。
5、 關(guān)閉當(dāng)前數(shù)據(jù)文件并保存。
6、 單擊左側(cè)助手欄中的“LC數(shù)據(jù)分析圖標(biāo)” →在數(shù)據(jù)瀏覽器中找到要計算的數(shù)據(jù)文件并“打開”
7、 文件→加載方法參數(shù)→選擇以保存的方法文件，打開→對話框中選擇“是”，計算完畢。
七、 數(shù)據(jù)文件中報告預(yù)覽和打印
1、 報告模板的制作：點(diǎn)擊 Top 返回上級引導(dǎo)操作欄，助手欄中點(diǎn)擊“再解析”
—“PDA數(shù)據(jù)分析”—“數(shù)據(jù)報告” 進(jìn)入報告界面。
2、 調(diào)入報告格式文件，用鼠標(biāo)將報告格式文件拖拽到右側(cè)報告欄內(nèi)即可。
3、 報告格式的制定和修改，可以通過點(diǎn)擊“樣品信息”、“方法信息”、“LC/PDA色譜圖”、“LC/PDA校正曲線”、“LC/PDA峰表” “LC/PDA結(jié)果”等內(nèi)容圖標(biāo)，拖拽鼠標(biāo)到報告中確定位置，即可依次加入相應(yīng)的統(tǒng)計信息。
4、 報告模板保存：文件—另存報告格式文件—Lc-solution路徑—文件名—保存。
5、 數(shù)據(jù)的打印：在文件收索器中選擇欲打印的數(shù)據(jù)文件，拖拽至報告模板中，
然后點(diǎn)擊助手欄中的打印按鈕即可。
九、實(shí)驗(yàn)結(jié)束
1、實(shí)驗(yàn)結(jié)束，用甲醇沖洗泵30min（若實(shí)驗(yàn)時用酸或緩沖鹽做流動相時，先用
純水先沖洗泵60min,然后用甲醇沖洗泵30min）。
2、點(diǎn)擊“儀器開/關(guān)”鍵，停泵，待泵的壓力下降到0.5Mpa以下，按關(guān)機(jī)順序
關(guān)閉儀器電源 。
3、清洗工具，打掃實(shí)驗(yàn)室，填寫《大型精密儀器設(shè)備使用記錄表》。
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