C18色譜柱和C8的區(qū)別及C18色譜柱壽命、維護(hù)、被污染怎么辦
C8柱是修飾的帶8個(gè)碳原子的硅烷，而C18是修飾的18個(gè)碳原子的硅烷。通常，我們檢測(cè)樣品首先選用C18柱；如果樣品的分子量較大，就選C8；如果分子量再大，就選C4。（不過也不是絕對(duì)，個(gè)人認(rèn)為選擇適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相更重要。
問：正常一個(gè)C18色譜柱使用壽命？
答：柱壽命一般不按時(shí)間計(jì)算，按持續(xù)進(jìn)樣針數(shù)比較科學(xué)。一般正常使用維護(hù)，不超過pH和溫度等范圍，C18柱能達(dá)到500-2000針進(jìn)樣的壽命，視樣品干凈程度的不同而不同。
問：一根常用的c18色譜柱，拿到一根新柱的時(shí)候應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù)？為什么要這樣做？
答：新柱活化，實(shí)際上是一個(gè)平衡的過程，除了用流動(dòng)相平衡外，有時(shí)候還必須用所測(cè)樣品對(duì)新柱進(jìn)行平衡，特別是測(cè)定分子量比較高的多肽，尤其重要。因?yàn)榉肿恿扛叩奈镔|(zhì)分子，擴(kuò)散速度慢，平衡所需時(shí)間也相應(yīng)較長(zhǎng)。具體平衡方式也很簡(jiǎn)單，多進(jìn)幾次樣品，直到峰面積和保留時(shí)間穩(wěn)定，再進(jìn)行正式進(jìn)樣測(cè)定。
如果要加快平衡時(shí)間，把前面用來平衡的進(jìn)樣樣品濃度加大，或者不等洗脫完成，連續(xù)進(jìn)樣多針。用待測(cè)物對(duì)新柱平衡，目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點(diǎn)的吸附能力飽和掉。
問：做農(nóng)藥殘留分析的，不同的基質(zhì)雜質(zhì)含量是不同的，我用C18分析時(shí)有可能一次就污染了，我用高流速，和反向沖洗都解決不了，是不是這根柱子就廢了，有沒有其他的辦法？
答：高流速反向沖洗是對(duì)的，關(guān)鍵你用了什么溶劑沖洗呢？用原來的流動(dòng)相沖洗肯定不管用，要不然就不會(huì)累積在柱子上了。你應(yīng)該用流動(dòng)相中的強(qiáng)溶劑B沖洗，如果不行，就需要啟用再生的程序，當(dāng)然再生時(shí)用的溶劑更強(qiáng)。
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